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外泌體研究解決方案
外泌體（Exosome）是真核細胞內(nèi)體中產(chǎn)生的細胞外囊泡（EV），直徑約為30-150 nm，具有雙層膜，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細胞培養(yǎng)基等生物體液中。外泌體攜帶有很多的遺傳物質(zhì)和參與細胞活動調(diào)控的重要蛋白，可通過自分泌或旁分泌途徑被細胞吸收，也可經(jīng)循環(huán)系統(tǒng)被遠距離靶組織或器官所吸收，參與各種正常和病理功能的細胞間通訊，在生命科學(xué)研究和生物技術(shù)中引起了人們的關(guān)注。外泌體能夠通過生物屏障，在細胞間傳遞功能性核酸分子，從而發(fā)揮各種生物學(xué)功能，有望成為一種新型給藥途徑及基因治療載體。
圖1 不同類型細胞的外泌體[1]
一、外泌體提取與鑒定
① 使用外泌體提取試劑盒提取外泌體。
② 納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)：快速實時動態(tài)檢測提取得到的外泌體的顆粒粒徑、散射光強、濃度等，分析外泌體的粒徑大小、數(shù)量和質(zhì)量。
圖2 NTA檢測外泌體粒徑
③ 透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope， TEM)：檢測外泌體的雙層囊膜結(jié)構(gòu)（亞顯微結(jié)構(gòu)）和形態(tài)。
圖3 TEM檢測外泌體形態(tài)
④ Western Blot：提取外泌體總蛋白， WB檢測外泌體常見指標：CD63/ CD81/ CD9/ TGS101/ HSP70 /Alix等。
圖4 WB檢測外泌體標志CD81[2]
相關(guān)技術(shù)服務(wù)
外泌體提取、電鏡TEM、粒徑NAT、WB
相關(guān)產(chǎn)品
二、外泌體內(nèi)容物研究
外泌體內(nèi)可能含有DNA、mRNA、miRNA、ncRNA、蛋白質(zhì)和小分子代謝物等，可利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)、表觀組學(xué)、代謝組學(xué)的研究手段對外泌體內(nèi)容物進行定量和定性分析。
相關(guān)服務(wù)
外泌體蛋白分析：DIA蛋白質(zhì)組、Label free蛋白質(zhì)組
外泌體修飾蛋白分析：磷酸化labelfree
外泌體代謝分析：非靶代謝、脂質(zhì)組
外泌體轉(zhuǎn)錄分析：Exosome RNA-seq、miRNA-seq
案例文獻
[1] Lai JJ et al. Exosome Processing and Characterization Approaches for Research and Technology Development. Adv Sci (Weinh). 2022 May;9(15):e2103222.
[2] Qiu Z et al. Human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosomal miR-335-5p attenuates the inflammation and tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation of renal tubular epithelial cells by reducing ADAM19 protein levels. Stem Cell Res Ther. 2022, 13(1):373.
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