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產(chǎn)品簡介

T7 耐高溫高產(chǎn)量 RNA 合成試劑盒可在較高溫度 50℃下進行體外轉(zhuǎn)錄，以含有 T7 啟動子序列的線性雙鏈 DNA 為模板、NTPs 為底物對啟動子下游 DNA 序列進行轉(zhuǎn)錄，獲得 RNA 產(chǎn)物。T7 耐高溫高產(chǎn)量 RNA 合成試劑盒也能以修飾核苷為底物獲得生物素、染料或放射性標(biāo)記的RNA，以帽子結(jié)構(gòu)或帽子類似結(jié)構(gòu)為底物獲得加帽的 RNA。高溫反應(yīng)有助于減少 dsRNA 副產(chǎn)物的形成，減少轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 的免疫原性。

本試劑盒內(nèi)含常用的修飾核苷 N1-Me-pUTP供轉(zhuǎn)錄需求選擇使用。

性能優(yōu)勢

下游應(yīng)用

轉(zhuǎn)錄合成的 RNA 可用于 RNA 結(jié)構(gòu)和功能研究、RNase 保護、探針雜交、anti-sense RNA 和RNAi 等應(yīng)用，也可通過加帽加尾產(chǎn)生mRNA，用于體外翻譯、轉(zhuǎn)染等下游應(yīng)用。 

1、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物產(chǎn)量低或轉(zhuǎn)錄失敗

①可能是模板自身原因，建議重新純化或線性化模板；

②重新確認模板定量及完整性；

③加大模板投入量；

2、產(chǎn)物電泳拖尾現(xiàn)象

①實驗操作過程被 RNase 污染；②DNA 模板被 RNase 污染；

3、RNA 產(chǎn)物片段與預(yù)期不符

①質(zhì)粒模板沒有完全線性化；

②RNA 存在未完全變性的二級結(jié)構(gòu)，建議使用變性膠檢測 RNA 產(chǎn)物；

③模板 GC 含量高，可能形成高級結(jié)構(gòu)；

④RNase 污染；

⑤模板序列中包含類似 T7 RNA 聚合酶終止序列，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄提前終止，建議嘗試不同的 RNA聚合酶。